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    多肽合成及设备

    多肽的化学合成方法:

    固相合成法:1963年,R.B.Merrifield创立了将氨基酸的C末端固定在不溶性树脂上,然后在此树脂上依次缩合氨基酸、延长肽链、合成蛋白质的固相合成法。在固相法中,每步反应后只需简单地洗涤树脂,便可达到纯化目的,克服了经典液相合成法中的每一步产物都需纯化的困难,为自动化合成肽奠定了基础。为此,Merifield获得1984年诺贝尔化学奖。
    经过不断发展,现在固相法主指Fmoc法, 以树脂为固相载体,将保护氨基酸共价连接在固相载体上, 然后通过去掉其保护基, 再把第二个保护氨基酸接到第一个氨基酸上, 重复反应,直至合成完所需要的肽链长度, 再通过相应的裂解试剂, 把肽能树脂上释放出来,经纯化冻干得到精品。
    优点:用于中长肽的合成, 粗品肽纯度较高
    缺点:成本高,溶剂使用量大,合成规模较小

     

    液相合成法:主要采用BOC和Z两种保护方法,主要应用在短肽合成
    优点:成本相对低,溶剂使用量小,合成规模容易放大
    缺点:操作繁琐周期长,粗品纯度差
    莱昂团队另辟蹊径, 开发出了许多肽的连续合成的方法,其效率堪比固相合成法,又同时解决了操作繁琐与粗品纯度差的问题。

     

    毫克及千克级液相固相合成反应器(釜)

    多肽纯化及设备

    多肽纯化:

    当前化学合成多肽的纯化方法,主要采用反相高效液相色谱法, 常用的流动相体系是水加乙腈或甲醇,以三氟乙酸(TFA)为离子对试剂,根据不同多肽以合适的梯度洗脱分离多肽。 多数多肽都是在TFA体系下分离纯化的,所以多肽以TFA盐的形式最多,其次药物肽一般有醋酸盐及盐酸盐的形式,极少数药物肽会有一些特殊的盐形式。转盐方式多为离子交换法和HPLC法,而脱盐可用G25柱(安马西亚出的一种葡聚糖凝胶柱)。

    毫克及千克级反相高效液相纯化设备

    多肽冻干及设备

    多肽冻干:多肽通过HPLC分离纯化后, 通过旋转蒸发仪去掉大部分的有机溶剂与水, 然后再利用冻干机冻干多肽。
    冻干多肽的保存:
    保存在冰冻条件下,最好 -20℃,若保存在-10℃以下, 大多数肽可维持几年的活性。
    使用冰冻产品时, 开盖之前, 瓶或试管应在装有新鲜干燥剂的干燥箱内升至室温。
    对于保存于-20℃的产品, 这个过程需要一小时或更长, 随包装大小而异。
    否则, 当瓶打开时, 水气进入导致多肽凝缩而降低其稳定性。一旦打开, 应迅速称量完毕, 并立即密闭以免潮解, 尤其亲水肽更应注意。

    毫克及千克级抽真空低温冷冻干燥设备

    多肽应用

    多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质。自人工方法合成多肽以来.伴随着分子生物学、生物化学技术的发展,多肽的研究取得了惊人进展。
    目前多肽的应用主要集中在多肽药物、多肽药物载体、组织工程材料和多肽营养食品等方面。
    1、抗肿瘤多肽
    2、抗病毒多肽
    3、多肽导向药物
    4、细胞因子模拟肽
    5、抗菌性活性肽
    6、用于心血管疾病的多肽
    7、其它药用小肽
    8、诊断用多肽
    9、多肽疫苗
    10、多肽药物载体
    11、组织工程材料
    12、多肽营养食品
    13、化妆品多肽

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